Vyšetření mutací v kinázové doméně BCR-ABL1 metodou přímého sekvenování
Popis vyšetření
Vyšetření mutací v kinázové doméně BCR-ABL umožňuje zjištění typu mutace a určení zastoupení BCR-ABL transkriptu s mutací z celkové hladiny BCR-ABL transkriptu. Z kinetiky hladiny mutovaného klonu a hladiny celkového BCR-ABL je možné včas zjistit rozvíjející se rezistenci na léčbu a přispět k optimalizaci léčebného postupu
Akreditovaná metoda
NRL_04_SOP_14_01 postup B
Synonymum
Mutace v kinázové doméně BCR-ABL
Vyšetřovaný materiál
Periferní krev, kostní dřeň
Odběr
Periferní krev a kostní dřeň se standardně odebírá do protisrážlivého roztoku EDTA, případně ACD. Nelze použít vzorky odebrané do heparinu (heparin inhibuje PCR reakce, vyšetření tedy nelze provést z takto odebraných vzorků).
Pro vyšetření lze přijímat i jiný biologický materiál dle specifikací uvedených pro jednotlivá vyšetření v záložce vyšetřovaný materiál
Manipulace s materiálem (transport)
Vzorek musí být pro přepravu zabezpečen tak, aby nemohlo dojít k rozlití, potřísnění biologickým materiálem nebo jinému znehodnocení vzorku.
Vzorek periferní krve/kostní dřeně by měl být doručen do laboratoře co nejdříve po jeho odběru. Maximální doba uchování a transportu vzorků periferní krve/kostní dřeně je dva dny od náběru. Není zapotřebí zvláštních opatření pro transport, vzorek se pouze nesmí vystavit zahřátí (např. vystavení slunci, držení v ruce apod.). Přesahuje-li doba od náběru 3 hodiny, je vhodné jej transportovat při 4°C. Při této teplotě je možné jej skladovat až 2 dny. Transport vzorku zajišťuje zadavatel a odpovídá za něj. Laboratoř nekontroluje hodinu odběru. Systém vnitřní kontroly vyšetřovaných vzorků je totiž na laboratoři nastaven tak, aby odhalil pochybení v kvalitě vyšetřovaného materiálu.
Specifikace uchování a přepravy pro jiný biologický materiál, který může být použit pro jednotlivá vyšetření, je uvedena v v záložce vyšetřovaný materiál.
Faktory ovlivňující vyšetření
Postup lze užít pro primární vzorky nesrážlivé periferní krve nebo kostní dřeně.
Pro spolehlivou detekci transkriptu BCR-ABL je nutná intaktní RNA. Proto vzorky periferní krve (kostní dřeně) musí být odebírány a transportovány tak, aby nedocházelo k odumírání buněk a nebyly zahájeny degradační procesy (v chladu, nikoli zmraženy). Vzorky jsou zpracovávány maximálně 3. den po odběru.
Vzorky periferní krve (kostní dřeně) musí být odebírány do protisrážlivého činidla (nejlépe EDTA nebo citrátové antikoagulans, např. ACD, není doporučen heparin!), které zabezpečuje dlouhou životaschopnost leukocytů a zamezuje degradaci vzorku. Nutným předpokladem úspěšného vyšetření primárního vzorku je přítomnost dostatečného množství živých buněk (leukocytů). V případě periferní krve je požadováno množství 5-10 ml, které by mělo zajistit nejméně 2x107 leukocytů pro analýzu.
Validní výsledek vyšetření není garantován, pokud je hladina transkriptu BCR-ABL pacienta ≤0,1% [IS].
Dostupnost
Běžná doba: 20 dní od dodání vzorku ● Statim: 4 dny od dodání vzorku ● Uvedený počet dní znamená počet pracovních dní od dodání primárního vzorku (odebraného dle této LP) s řádně vyplněnou žádankou do laboratoře do data uvolnění výsledku.
Info o laboratoři
Informace pro zadavatele
Veškerá vyšetření lze provést pouze na základě informovaného souhlasu pacienta.
Datum poslední aktualizace
16.10.2024